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高效液相色譜分析的流程。 由泵將儲(chǔ)液瓶中的溶劑吸入色譜系統(tǒng)，然后輸出，經(jīng)流量與壓力測(cè)量之后，導(dǎo)入進(jìn)樣器。 被測(cè)物由進(jìn)樣器注入，并隨流動(dòng)相通過(guò)色譜柱，在柱上進(jìn)行分離后進(jìn)入檢測(cè)器，檢測(cè)信號(hào)由數(shù)據(jù)處理設(shè)備采集與處理，并記錄色譜圖。
液相色譜&質(zhì)譜聯(lián)用，簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)，就是把這一堆同樣名字的人（同樣保留時(shí)間的物質(zhì)）單獨(dú)叫出來(lái)（分離出來(lái)），然后依次比對(duì)他們本質(zhì)的基因片段（質(zhì)荷比）。 雖說(shuō)直接對(duì)比基因片段（質(zhì)荷比）有時(shí)候也可以出結(jié)果，但是先用名字（保留時(shí)間）來(lái)結(jié)合辨別效率會(huì)更快，準(zhǔn)確度也更高，這也就是為什么要做液相色譜&質(zhì)譜聯(lián)用的原因。
高效液相色譜由儲(chǔ)液器，泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成，儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相，被流動(dòng)相載入色譜柱內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)，經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附—解吸的分配過(guò)程，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出，通過(guò)檢測(cè)器時(shí)，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀。 高效液相色譜儀主要包括高壓輸送系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)及梯度洗脫等輔助裝置。
80%的有機(jī)化合物都可以用高效液相色譜分析，目前以已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生物工程、制藥工程、食品工業(yè)、環(huán)境檢測(cè)、石油化工等行業(yè)。 高效液相色譜至少包括輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣器、分離柱、檢測(cè)器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等幾部分。 1 輸液系統(tǒng)： 包括貯液及脫氣裝置、高壓輸液泵和梯度洗脫裝置。 貯液裝置用于存貯足夠量、符合HPLC要求的流動(dòng)相。 高效液相色譜柱填料顆粒比較小，通過(guò)柱子的流動(dòng)相受到的流動(dòng)阻力很大，因此需要高壓泵輸送流動(dòng)相。 將待測(cè)的樣品引入到色譜柱的裝置。 液相色譜進(jìn)樣裝置需要滿足重復(fù)性好、死體積小、保證柱中心進(jìn)樣、進(jìn)樣時(shí)引起的流量波動(dòng)小、便于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化等多項(xiàng)要求。 進(jìn)樣系統(tǒng)包括取樣、進(jìn)樣兩項(xiàng)功能。 色譜柱是色譜儀的心臟、柱效高、選擇性好、分析速度快是對(duì)色譜柱的一般要求。
